लेखक: Bobbie Johnson
निर्माण की तारीख: 4 अप्रैल 2021
डेट अपडेट करें: 21 नवंबर 2024
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जेल वैद्युतकणसंचलन
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विषय

इलेक्ट्रोफोरोसिस एक प्रयोगशाला तकनीक है जो अणुओं को उनके आकार और विद्युत आवेश के अनुसार अलग करने के उद्देश्य से की जाती है ताकि रोगों का निदान किया जा सके, प्रोटीन अभिव्यक्ति को सत्यापित किया जा सके या सूक्ष्मजीवों की पहचान की जा सके।

वैद्युतकणसंचलन एक सरल और कम लागत वाली प्रक्रिया है, जिसका उपयोग प्रयोगशाला दिनचर्या और अनुसंधान परियोजनाओं में किया जा रहा है। इलेक्ट्रोफोरोसिस के उद्देश्य के अनुसार, निदान तक पहुंचने के लिए अन्य परीक्षणों और परीक्षाओं को करना आवश्यक हो सकता है, उदाहरण के लिए।

ये किसके लिये है

इलेक्ट्रोफोरेसिस विभिन्न उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है, अनुसंधान परियोजनाओं और निदान दोनों में, क्योंकि यह एक सरल और कम लागत वाली तकनीक है।इस प्रकार, वैद्युतकणसंचलन किया जा सकता है:

  • वायरस, कवक, बैक्टीरिया और परजीवी की पहचान करें, इस एप्लिकेशन के अनुसंधान परियोजनाओं में अधिक सामान्य होने के साथ;
  • पितृत्व जांच;
  • प्रोटीन की अभिव्यक्ति की जांच करें;
  • म्यूटेशन की पहचान करें, उदाहरण के लिए, ल्यूकेमिया के निदान में उपयोगी होना;
  • सिकल सेल एनीमिया के निदान में उपयोगी होने, हीमोग्लोबिन के परिसंचारी के प्रकारों का विश्लेषण;
  • रक्त में मौजूद प्रोटीन की मात्रा का आकलन करें।

वैद्युतकणसंचलन के उद्देश्य के अनुसार, निदान को पूरा करने के लिए डॉक्टर के लिए अन्य पूरक परीक्षणों को करना आवश्यक हो सकता है।


कैसे किया जाता है

वैद्युतकणसंचलन करने के लिए, जेल की आवश्यकता होती है, जो कि यूवी या एलईडी प्रकाश उपकरणों के अलावा, इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर और वैट, आणविक भार मार्कर और एक फ्लोरोसेंट डाई के आधार पर पॉलीक्रैलेमाइड या एग्रोस हो सकता है, जिसे ट्रांसिल्यूमिनर के रूप में भी जाना जाता है।

जेल तैयार करने के बाद, एक विशिष्ट वस्तु को रखा जाना चाहिए ताकि कुओं को जेल में बनाया जाए, जिसे लोकप्रिय रूप से कंघी कहा जाता है, और जेल को सेट होने दें। जब जेल तैयार हो जाता है, तो पदार्थों को कुओं पर लागू करें। इसके लिए, एक आणविक भार मार्कर को कुओं में से एक में रखा जाना चाहिए, एक सकारात्मक नियंत्रण, वह पदार्थ जो ज्ञात है कि यह क्या है, एक नकारात्मक नियंत्रण है, जो प्रतिक्रिया की वैधता की गारंटी देता है, और नमूनों का विश्लेषण किया जाना है। सभी नमूनों को एक फ्लोरोसेंट डाई के साथ मिलाया जाना चाहिए, क्योंकि इस तरह से ट्रांसिल्युमिनेटर पर बैंड की कल्पना करना संभव है।

नमूनों वाले जेल को वैद्युतकणसंचलन वैट में रखा जाना चाहिए, जिसमें विशिष्ट बफर समाधान होता है, और फिर डिवाइस चालू होता है ताकि विद्युत प्रवाह हो और, संभावित रूप से, संभावित अंतर, जो उनके अनुसार जुदाई कणों के लिए महत्वपूर्ण है लोड और आकार। इलेक्ट्रोफोरेटिक रनिंग टाइम प्रक्रिया के उद्देश्य के अनुसार बदलता रहता है, और 1 घंटे तक चल सकता है।


निर्दिष्ट समय के बाद, ट्रांसिल्यूमिनेटर के माध्यम से चलने वाले इलेक्ट्रोफोरेटिक के परिणाम को देखना संभव है। जब जेल को यूवी या एलईडी लाइट के नीचे रखा जाता है, तो बैंडिंग पैटर्न की कल्पना करना संभव है: जितना बड़ा अणु, उतना छोटा माइग्रेशन, कुएं के करीब पहुंचना, जबकि अणु को हल्का करना, प्रवासी क्षमता जितनी अधिक होगी।

मान्य किए जाने वाले प्रतिक्रिया के लिए, सकारात्मक नियंत्रण के बैंड की कल्पना की जानी चाहिए और नकारात्मक नियंत्रण में कुछ भी कल्पना नहीं की जानी चाहिए, अन्यथा यह एक संकेत है कि संदूषण था, और पूरी प्रक्रिया को दोहराया जाना चाहिए।

वैद्युतकणसंचलन के प्रकार

वैद्युतकणसंचलन अलग-अलग उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है और, इसके उद्देश्य के अनुसार, कई प्रकार के जेल का उपयोग किया जा सकता है, सबसे आम है पॉलीक्रैलेमाइड और agarose।


सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए वैद्युतकणसंचलन अनुसंधान प्रयोगशालाओं में किया जाना अधिक आम है, हालांकि, नैदानिक ​​उद्देश्यों के लिए, वैद्युतकणसंचलन का उपयोग हेमेटोलॉजिकल रोगों और रोगों की पहचान करने के लिए किया जा सकता है जो प्रोटीन की मात्रा में वृद्धि के साथ विकसित होते हैं, जो मुख्य प्रकार के वैद्युतकणसंचलन हैं:

1. हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन

हीमोग्लोबिन इलेक्ट्रोफोरेसिस एक प्रयोगशाला तकनीक है जो रक्त में घूमने वाले विभिन्न प्रकार के हीमोग्लोबिन की पहचान करने के लिए की जाती है, जिससे हीमोग्लोबिन संश्लेषण से संबंधित रोगों की उपस्थिति की पहचान करना संभव हो जाता है। हीमोग्लोबिन के प्रकार की पहचान एक विशिष्ट पीएच में वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से की जाती है, आदर्श रूप से 8.0 और 9.0 के बीच, बैंड के पैटर्न के साथ जो सामान्य पैटर्न की तुलना में हो सकता है, असामान्य हीमोग्लोबिन की पहचान की अनुमति देता है।

इसके लिए क्या बनाया गया है: हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन हेमोग्लोबिन संश्लेषण से संबंधित रोगों की जांच और निदान करने के लिए किया जाता है, जैसे सिकल सेल एनीमिया और हीमोग्लोबिन सी रोग, थैलेसीमिया को अलग करने में उपयोगी होने के अलावा। हीमोग्लोबिन वैद्युतकणसंचलन की व्याख्या करना सीखें।

2. प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन

प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन एक परीक्षा है जो डॉक्टर द्वारा रक्त में घूम रहे प्रोटीन की मात्रा का आकलन करने के लिए और इस प्रकार, रोगों की पहचान करने के लिए अनुरोध की जाती है। यह परीक्षा रक्त के नमूने से की जाती है, जिसे प्लाज्मा, प्रोटीन के अन्य पदार्थों के अलावा, रक्त के हिस्से को प्राप्त करने के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है।

वैद्युतकणसंचलन के बाद, बैंड के एक पैटर्न की कल्पना की जा सकती है और बाद में, एक ग्राफ जिसमें प्रोटीन के प्रत्येक अंश की मात्रा का संकेत दिया गया है, निदान के लिए मौलिक है।

इसके लिए क्या बनाया गया है: प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन बैंड की पद्धति और परीक्षा रिपोर्ट में प्रस्तुत ग्राफ के अनुसार कई मायलोमा, निर्जलीकरण, सिरोसिस, सूजन, यकृत रोग, अग्नाशयशोथ, ल्यूपस और उच्च रक्तचाप की घटना की जांच करने की अनुमति देता है।

समझें कि यह कैसे किया जाता है और प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन के परिणाम को कैसे समझा जाए।

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